【產(chǎn)品簡介】

Polybrene（聚凝胺，hexadimethrine bromide）是一種聚溴化季銨陽離子，可顯著提高慢病毒(lentivirus)、腺病毒(adenovirus)等病毒對細胞的感染效率，作用機理可能是通過中和細胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥從而促進吸附作用。Polybrene也是一種有名的抗肝素劑（肝素拮抗劑），常用來生產(chǎn)非特異性凝集的紅細胞。另外Polybrene也多用于蛋白測序，因為小劑量的Polybrene在自動測序分析可明顯改善多肽的降解現(xiàn)象。PVDF膜加入polybrene還能提高膜的親和性。

本產(chǎn)品以溶液形式提供，粉末用0.9% NaCl配制成10 mg/mL的溶液，并用0.22 μM濾膜過濾除菌。使用時一般按1:1000-1:2000 稀釋，細胞種類不同稀釋比例不同，具體查閱相關(guān)文獻。

【儲存方式】

-20℃保存，有效期2年。

【使用方法】

操作前注意事項

1.為避免反復(fù)凍融，收到本產(chǎn)品或本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃保存；
2.因為Polybrene對某些細胞可能有一定的毒性，而且Polybrene長時間作用(大于12小時)也可能對某些細胞產(chǎn)生毒性，所以初次使用Polybrene處理細胞，建議先做毒性測試；
3.本產(chǎn)品可能對人體有一定的毒害作用，請注意適當防護，以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)；
4.本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用，不得用于臨床醫(yī)學(xué)診斷及其他非合理用途；
5.為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套進行實驗操作。

操作步驟

推薦工作濃度：

Polybrene最佳終濃度因不同細胞株而異，通常范圍在2~10μg/ml，最常用的濃度為5~8μg/ml?？梢酝ㄟ^查閱相關(guān)文獻或者預(yù)實驗來摸索。

使用方法：

a.Day1：按實驗需要將細胞鋪板(比如12孔板)。細胞數(shù)以第2天密度約50%為宜。37℃培養(yǎng)過夜。
b.Day2：病毒感染前，從-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化，參考相關(guān)文獻或者根據(jù)預(yù)實驗得到的MOI值用新鮮完全培養(yǎng)基將病毒稀釋成所需濃度，并加入適量Polybrene，輕輕混勻。
c.吸除細胞原有培養(yǎng)基，將病毒液+培養(yǎng)基+Polybrene加入細胞中，輕輕搖勻。37℃繼續(xù)培養(yǎng)。
d.Day4：吸除含病毒的培養(yǎng)基，換為新鮮的培養(yǎng)基。此時可以加入相應(yīng)抗生素進行篩選。
e.Day5-6：根據(jù)需要收集細胞檢測目的蛋白的表達。